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伯樂電泳槽常見問題及解決辦法

更新時間:2016-01-18瀏覽:4830次
 1、伯樂電泳槽紋理和托尾現(xiàn)
 
   由于樣品溶解不佳引起的,克服的方法可以在加樣前離心,增加一些增溶輔助試劑如尿素。
 
2、蛋白帶過寬
 
   與鄰近泳道的蛋白帶相連時由于加樣量太多,可以減少上樣量。
 
3、伯樂電泳槽電泳時間比正常要長
 
    可能由于凝膠緩沖系統(tǒng)和電極緩沖系統(tǒng)的PH選擇錯誤,即緩沖系統(tǒng)的PH和被分離物質(zhì)的等電點差別太小,或緩沖系統(tǒng)的離子強(qiáng)度太高。
 
4、指示劑成微笑符號(指示劑前沿呈現(xiàn)向上的曲線形)
 
   說明凝膠的不均勻冷卻,中間部分冷卻不好,導(dǎo)致分子有不同的遷移率所致。
 
5、指示劑成哭臉符號(指示劑前沿呈現(xiàn)向下的曲線形)
 
    由于電泳槽的裝置不合適,尤其是凝膠和玻璃板組成的“三明治”底部有氣泡或靠近隔片的凝膠聚合不*。
 
6、伯樂電泳槽凝膠時間不對
 
    通常膠在60min,1H內(nèi)凝,如果凝的太慢,可能是TEMEN,APS劑量不夠或者失效。APS應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用,TEMED不穩(wěn)定,容易被氧化成黃色。如果凝的太快,可能是APS和TEMED用量過多,此時膠太硬易裂,電泳時易燒膠。
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